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技術(shù)文章

實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品稀釋法

閱讀:4664          發(fā)布時(shí)間:2020-7-19

實(shí)時(shí)熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料,利用熒光信號(hào)積累對(duì)PCR反應(yīng)的過程,進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)現(xiàn)起始模板的準(zhǔn)確定量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋方法依次是選擇目標(biāo)、提取/PCR、純化、測(cè)試濃度、調(diào)整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間,覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法:1V原液(標(biāo)準(zhǔn)品為i+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為ii。1V標(biāo)準(zhǔn)品ii+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為iii, 1V標(biāo)準(zhǔn)品iii+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為iv, 1V標(biāo)準(zhǔn)品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標(biāo)準(zhǔn)品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標(biāo)準(zhǔn)品iiiii、ivv,標(biāo)準(zhǔn)品要復(fù)管做測(cè)試,復(fù)管次數(shù)要遵循統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。熒光PCR凍干時(shí),制品溶液厚度不宜過厚。一般應(yīng)為10-15mm,制品過厚的情形類似于濃度過高時(shí)的情況,不僅干燥的時(shí)間更長,塌陷、結(jié)塊。凍干機(jī)Pilot3-6T醫(yī)療應(yīng)用涉及產(chǎn)品有:熒光PCR、免疫微球、化學(xué)發(fā)光、基因芯片、量子點(diǎn)、ELISA、膠體金、POCT、IVD校準(zhǔn)品質(zhì)控品校準(zhǔn)品、內(nèi)毒素檢測(cè)試劑、血清、白蛋白、干細(xì)胞及相應(yīng)提取物等。

型號(hào)

Pilot3-6T

Pilot5-8T

Pilot7-12T

Pilot10-15T

凍干面積

0.42

0.56

0.84

1.05

22西林瓶裝量(20ML

≥900

≥1170

≥1500

≥2100

16西林瓶裝量(5ML

≥1700

≥2210

≥3100

≥4100

冷阱溫度(空載)

-85

真空度(空載)

≤1Pa

板層溫度(空載)

-55

板層制冷方式

硅油循環(huán)

板層數(shù)量

3+1

4+1

4+1

5+1

板層尺寸(mm

350*400

350*400

350*600

350*600

捕水能力

6L

8L

12L

10L

凍干效率

3L/24H

5L/24H

7L/24H

10L/24H

板層間距

100mm

80mm

90mm

100mm

穿墻隔離

凍干曲線擬合度

100%

100%

100%

100%

晶型控制

蒸汽分壓控制

升華結(jié)束判定

凍干終點(diǎn)測(cè)試

壓塞

液壓

整機(jī)尺寸 (約)

W860*D1400*H1800

W860*D1400*H1800

W860*D1700*H1900

W860*D1700*H1900

 

 

 

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