甘油三酯(TG)測(cè)試盒操作說(shuō)明
產(chǎn)品名稱(chēng):甘油三酯(TG)測(cè)試盒
貨號(hào):XFC121
儲(chǔ)存條件:2-8℃
有效期:12個(gè)月
用途:本試劑盒采用 GPO-PAP 法配制,用于體外測(cè)定甘油三 酯含量。適用于各型酶標(biāo)儀。
性能指標(biāo):
1、試劑空白管吸光度≤0.200(光徑 0.5cm)。
2、線性:0.3~11.4mmol/L 范圍內(nèi),r2>0.995。
3、準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。
4、靈敏度:測(cè)試 2.7mmol/L 被測(cè)物時(shí),吸光度值△A 在 0.2000~0.4000 之間。
5、重復(fù)性:測(cè)量精密度≤5.0%,批間差≤8.0%。
6、穩(wěn)定性:原包裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為 12 個(gè)月。開(kāi)啟后 2℃~8℃避光可穩(wěn)定一個(gè)月。
操作過(guò)程:
1、樣本處理:
①、血清(漿):直接測(cè)定,如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀 釋后測(cè)定。
②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分 鐘,取上清測(cè)定。[注]:一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn) 個(gè)/mL 以上。
③、組織樣本:準(zhǔn)確稱(chēng)取組織重量,按重量(g):體積 (mL)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰水 浴條件下機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清 液待測(cè)。[注]:如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質(zhì) 用 磷 酸 鹽 緩 沖 液 (0.1mol/L pH 7.4) 或 生 理 鹽 水 (0.9%)進(jìn)行提?。蝗缃M織樣本為高脂樣本或部分 為高脂樣本,勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無(wú)水乙醇進(jìn)行提取。
④、細(xì)胞樣本:
A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/ 分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;用 等滲緩沖液(推薦 0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸鹽 緩沖液)清洗 1~2 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;
B、細(xì)胞破碎:加入 0.2~0.3mL 的勻漿介質(zhì)(推薦 0.1mol/L pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水) 進(jìn) 行 勻 漿 , 冰 水 浴 條 件 下 超 聲 破 碎 ( 功 率:300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重復(fù) 3~5 次)或 手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不離心直接測(cè)定。也 可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100,1~2%,裂 解 30~40 分鐘),裂解好的液體不離心直接測(cè)定。
[注]:建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/mL 以上。破碎 好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎完-全
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