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液相色譜系統(tǒng)是一種在化學(xué)、生物、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的重要分析工具，它主要由多個(gè)關(guān)鍵部分協(xié)同工作來實(shí)現(xiàn)對混合物中各成分的分離與分析，其核心原理基于樣品中不同組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配差異。當(dāng)流動(dòng)相攜帶樣品通過裝有固定相的色譜柱時(shí)，各組分與固定相和流動(dòng)相的作用力不同，導(dǎo)致它們在柱中的遷移速度不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。
液相色譜系統(tǒng)各流程之間的校準(zhǔn)方法：
1.流速校準(zhǔn)：
-稱重法：在一定的流速設(shè)置下，準(zhǔn)確收集一段時(shí)間內(nèi)流出的流動(dòng)相，通過稱重計(jì)算實(shí)際流速。例如，以甲醇為流動(dòng)相，按設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集10 -25分鐘，稱重后根據(jù)流動(dòng)相的密度計(jì)算實(shí)際流速，與設(shè)定流速進(jìn)行比較，偏差應(yīng)在允許范圍內(nèi)。
-儀器自帶校準(zhǔn)功能：許多現(xiàn)代液相色譜儀具有自帶的流速校準(zhǔn)程序，可按照儀器操作手冊中的說明進(jìn)行操作，儀器會(huì)自動(dòng)對流速進(jìn)行校準(zhǔn)和調(diào)整。
2.檢測器校準(zhǔn)：
-波長校準(zhǔn)(針對紫外 -可見檢測器等)：使用合適的波長校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，如鈥玻璃濾光片等，調(diào)整檢測器的波長，使其與標(biāo)準(zhǔn)品的特征吸收波長相符，以確保檢測器在不同波長下的準(zhǔn)確性。
-靈敏度校準(zhǔn)：使用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)樣，設(shè)置合理的流速和檢測器參數(shù)，調(diào)整檢測器增益，逐漸增大信號(hào)幅度，記錄增益值，并與儀器規(guī)格進(jìn)行比較。
3.進(jìn)樣器校準(zhǔn)：
-對于手動(dòng)進(jìn)樣器，可使用微量注射器抽取已知體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液，多次進(jìn)樣，根據(jù)進(jìn)樣后色譜峰的響應(yīng)值計(jì)算實(shí)際進(jìn)樣量，與理論進(jìn)樣量進(jìn)行比較，評(píng)估進(jìn)樣器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
-對于自動(dòng)進(jìn)樣器，可通過設(shè)置不同的進(jìn)樣量，連續(xù)多次進(jìn)樣，檢查進(jìn)樣量的準(zhǔn)確度和精密度是否符合要求。同時(shí)，檢查進(jìn)樣器的進(jìn)樣順序、交叉污染等情況。
4.保留時(shí)間校準(zhǔn)：
-使用含有多種組分的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，通過比較標(biāo)準(zhǔn)品中各組分在液相色譜圖上的保留時(shí)間，對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。可在相同的色譜條件下，定期進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)品溶液，觀察保留時(shí)間的變化情況，若超出允許范圍，則需要進(jìn)行調(diào)整。
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