經(jīng)皮給藥制劑透皮擴散試驗（IVPT）的關鍵注意事項

一、皮膚模型的標準化選擇與處理

1. 優(yōu)先選擇巴馬香豬皮膚

巴馬香豬皮膚因角質層厚度（15-20μm）、毛囊密度（11-14個/cm²）及脂質組成（神經(jīng)酰胺含量與人類接近）與人類皮膚高度相似，被推薦為IVPT的“金標準”模型。其藥物滲透率與人體數(shù)據(jù)的相關性（R²可達0.85-0.95）顯著優(yōu)于小鼠等其他動物模型。 其優(yōu)勢不僅體現(xiàn)在科學準確性上，還兼顧了實驗可行性和倫理合規(guī)性，是藥物開發(fā)、化妝品評估等領域不可替代的工具。

北京YSKD 元森凱德生物公司巴馬香豬皮，有資質，并已經(jīng)被發(fā)表高分論文

備注：北京元森凱德生物技術公司（YSKD Bio-technology Beijing,China）的實驗用巴馬香豬豬皮是一種用于透皮試驗、燒傷研究、心血管研究等領域的動物模型。它的皮膚與人類的皮膚非常相似，具有優(yōu)良的品質和穩(wěn)定的遺傳基因。實驗用巴馬香豬月齡20 -45天，豬皮的大小約為A4紙大小，厚度1mm左右，無添加化學試劑，全程冷鏈運輸。

有實驗動物養(yǎng)殖許可的養(yǎng)殖場，可提供質量合格證，個案信息表

收到后儲于-18℃冷凍儲存，時間不宜超出三個月，該巴馬小豬皮膚已經(jīng)經(jīng)過加工處理，皮下組織以及毛發(fā)均處理干凈，可以直接用于實驗。

中國科學院海洋研究所，青島海洋科技中心海洋藥物與生物產(chǎn)品實驗室，中國科學院大學等采購北京元森凱德生物公司巴馬香豬皮

2. 皮膚完整性驗證

- 完整性測試方法：需在實驗前后采用經(jīng)皮水分散失（Trans Epidermal Water Loss, TEWL）法或電阻抗法驗證皮膚屏障完整性。例如，TEWL接受標準通常為≤15g/m²/hr（人體軀干皮膚），高于此閾值則需排除。

- 電阻抗范圍：FDA規(guī)定電阻值應介于空白介質溶液電阻的3-20倍之間，過低（屏障受損）或過高（角質層過厚）均需剔除。

3. 離體皮膚的保存與活性維持

- 巴馬香豬離體皮膚需在24-48小時內使用，避免冷凍保存導致的角質層結構破壞。實驗前需平衡皮膚溫度至32℃±0.5℃，以模擬生理條件。

二、實驗設計與操作規(guī)范

1. 擴散池的選擇與校準

- 推薦使用符合《美國藥典》和NMPA指導原則的改良型Franz垂直擴散池，確保擴散面積（1.77cm²）和溫度控制精度（±0.5℃）。

- 需定期校驗設備，如自動取樣器的誤差應≤±0.1ml，并執(zhí)行3Q驗證（安裝、操作、性能確認）。

2. 環(huán)境條件控制

- 溫濕度：實驗環(huán)境需控制在21℃±2℃、濕度50%±20% RH，開放式TEWL設備需額外注意氣流干擾。

- 接收介質維護：接收液需恒溫（32℃）并定期補充（如每次取樣后補充等體積生理鹽水），避免體積變化影響濃度梯度。

3. 藥物施加與取樣規(guī)范

- 貼劑需裁剪為固定直徑（如14mm），確保與皮膚接觸無褶皺；半固體制劑應均勻涂抹，避免局部濃度過高。

- 取樣時間點需覆蓋藥物滲透動力學全過程（如1、2、4、6、8、12、24小時），并記錄每次取樣后的介質補充量。

三、數(shù)據(jù)可靠性與法規(guī)符合

1. 生物等效性驗證

- 仿制藥需通過IVPT與原研藥比較累積滲透量（Q）和滲透速率（J），需滿足90%置信區(qū)間在80%-125%內。例如，利斯的明貼劑研究中，皮膚電阻抗差異顯著影響滲透量，需通過篩選皮膚電阻范圍減少變異性。

2. 皮膚殘留藥物檢測

- 實驗結束后需剝離角質層（如膠帶剝離法）或橫切皮膚分層測定藥物含量，評估局部駐留與系統(tǒng)暴露量。但需注意膠帶剝離可能因粘合劑干擾藥物提取。

3. 審計追蹤與數(shù)據(jù)管理

- 實驗數(shù)據(jù)需存儲于具備審計追蹤功能的系統(tǒng)，記錄操作日志與溫度曲線，確保數(shù)據(jù)不可篡改并支持CDE發(fā)補要求。

四、常見風險與規(guī)避措施

1. TEWL測量誤差

- 不同品牌經(jīng)皮水分散失（Trans Epidermal Water Loss, TEWL）設備因探頭設計差異可能導致結果偏差。建議統(tǒng)一設備品牌，并通過增加探測器與液面高度校準（線性負相關，R²＞0.9）。

2. 皮膚分層分析局限性

- 組織切片法可能因皮膚層界面不平整導致分層誤差，推薦結合膠帶剝離與HPLC檢測，提高表皮層藥物定量準確性。

3. 法規(guī)動態(tài)關注

- 需持續(xù)跟蹤CDE《局部起效化學仿制藥IVPT研究技術指導原則》等更新，例如2024年征求意見稿強調需論證皮膚完整性測試方法的適用性。

IVPT的成功實施依賴于皮膚模型的標準化、設備精準度、環(huán)境控制及數(shù)據(jù)合規(guī)性管理。選擇巴馬香豬皮膚、結合TEWL與電阻抗法驗證完整性、使用自動化擴散系統(tǒng)可顯著提升實驗效率與結果可靠性。此外，跨學科合作（如藥代動力學與皮膚生理學）是優(yōu)化經(jīng)皮給藥制劑研發(fā)的關鍵。

附：北京元森凱德生物技術有限公司研制生產(chǎn)的動物霧化吸入給藥儀器，主要包括大/小動物肺部氣管直接遞送裝置（動物氣道霧化針）、動物口鼻吸入、僅鼻腔給藥、全身式暴露染毒、動物煙氣/PM2.5染毒系統(tǒng)、粉塵氣溶膠發(fā)生器、臭氧動物暴露裝置、動物高低壓氧艙，此外給客戶多樣化提供自動型實驗動物an'lesi系統(tǒng)（窒息系統(tǒng)、二氧化碳安樂處死箱），實驗動物除臭暫存系統(tǒng)，巴馬香豬皮，NGI Gentle Rocker智能洗盤裝置，NGI新一代撞擊器和ACI安德森撞擊器的校驗與檢測。

附：北京元森凱德生物技術有限公司（BEIJING YSKD BIO-TECHNOLOGY CO.,LTD），簡稱元森凱德（YSKD），2013年成立于北京中關村科技園，是一家專業(yè)從事生命科學類實驗儀器研制、生產(chǎn)與銷售的科技創(chuàng)新型企業(yè)。服務毒理學、藥理學、免疫學、生物安全、大氣污染物、化學物質毒性鑒定、臨床前藥物開發(fā)與安全性評價、呼吸系統(tǒng)、環(huán)境與健康等領域。

部分用戶案例：哈佛大學，麻省理工學院，新加坡國立大學，瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工學院，中國科學院上海藥物研究所，中國中醫(yī)科學院中藥研究所，麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司，康龍化成（寧波）生物醫(yī)藥有限公司，中日醫(yī)院呼吸病學研究中心/中日友好臨床醫(yī)學研究所，北京中醫(yī)藥大學，中國藥科大學，沈陽藥科大學，復旦大學，浙江大學，四川大學，中南大學湘雅醫(yī)學院等