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實(shí)驗(yàn)中峰形異常?可能是液相色譜柱沒(méi)有維護(hù)好!

來(lái)源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年04月23日 16:39  

液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件,正規(guī)品牌的色譜柱價(jià)格也不便宜,因此對(duì)于它的使用維護(hù)得相當(dāng)重視。經(jīng)常聽(tīng)到小伙伴抱怨買的新色譜柱,才用了一兩個(gè)月峰形就不行了。小編認(rèn)為可能不是色譜柱質(zhì)量的問(wèn)題,而是小伙伴沒(méi)有正確的使用沖洗導(dǎo)致的。下面小編就整理了一下色譜柱的安裝,使用和保存方法,大家趕緊看看吧!

 

色譜柱的安裝:

 

色譜柱在使用過(guò)程中避免強(qiáng)烈的碰撞和震動(dòng)。各個(gè)廠家生產(chǎn)的色譜柱在接口尺寸上會(huì)有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭兩者類型不匹配,將會(huì)產(chǎn)生漏液或者死體積過(guò)大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長(zhǎng),不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。

 

色譜柱的平衡和沖洗:

 

色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運(yùn)行幾遍測(cè)試,等觀察到峰形、保留時(shí)間和峰面積穩(wěn)定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時(shí),應(yīng)該先使用同等比例的水過(guò)渡,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發(fā)生,從而損壞色譜柱。同理,使用緩沖鹽之后,一定要用較大比例的水相沖洗60min以上,將色譜柱中的緩沖鹽沖洗干凈,防止鹽析。如果不使用緩沖鹽流動(dòng)相,也需要沖洗,用大比例的有機(jī)相沖洗柱內(nèi)的有機(jī)物,防止其沉積影響柱效或影響下一次實(shí)驗(yàn)譜圖。

 

色譜柱的保存:

 

遵守色譜柱說(shuō)明書(shū)中的保持方式。在實(shí)際應(yīng)用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動(dòng)相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時(shí)間。一般情況下,建議長(zhǎng)期用80%甲醇或乙腈來(lái)保存反相柱。純有機(jī)相保持有限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會(huì)將已水解而暫時(shí)吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進(jìn)程加快,縮短壽命;另外,純有機(jī)相保存時(shí),溶劑易揮發(fā),導(dǎo)致柱床變干,也會(huì)容易損壞色譜柱。正相柱一般應(yīng)保持在所用流動(dòng)相中。

 

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