如何根據(jù)液相系統(tǒng)配置合適的色譜柱

根據(jù)液相系統(tǒng)配置合適的色譜柱

  可擴(kuò)展的顆粒技術(shù)確保了我們的液相色譜柱可與廣泛的色譜儀器匹配使用。根據(jù)分離的目標(biāo)、所用的儀器平臺或所分析的樣品類型，您可以選擇與系統(tǒng)配置匹配的更合適的色譜柱而不對色譜結(jié)果產(chǎn)生不利影響。

下表為根據(jù)儀器的分類選擇合適的液相色譜柱提供了指南。

色譜柱配置

  系統(tǒng)擴(kuò)散是每個色譜系統(tǒng)固有的，它是造成色譜譜帶展寬的儀器因素，并取決于系統(tǒng)管路體、切換閥配件、柱連接以及流通池體積。系統(tǒng)擴(kuò)散與色譜柱擴(kuò)散一起構(gòu)成了影響分離的總擴(kuò)散因素。

  因此，在選擇色譜柱配置時了解系統(tǒng)對于色譜峰譜帶展寬的影響是非常重要的。擴(kuò)散值高的系統(tǒng)使用較大柱體積的色譜柱可以獲得更好柱效；相反，擴(kuò)散值低的系統(tǒng)使用較小柱體積的色譜柱可以獲得更好柱效。

  下表總結(jié)了沃特世液相系統(tǒng)的參數(shù)特點(diǎn)以及在保證色譜分離效率條件下可匹配的色譜柱配置。

  在液相方法轉(zhuǎn)移時，儀器擴(kuò)散也是需考慮的液相色譜儀器參數(shù)之一。了解儀器的譜帶展寬體積有助于開發(fā)系統(tǒng)兼容的方法，使您無縫縮放色譜柱規(guī)格或?qū)崿F(xiàn)方法在不同儀器平臺和實(shí)驗(yàn)室功能方面的轉(zhuǎn)換。下表是根據(jù)不同儀器的譜帶展寬值給出的色譜柱配置建議。

液相色譜柱的L/dp值對比表

  為了保證一個HPLC方法轉(zhuǎn)移到UPLC或UHPLC方法時不損失分離度，需要選擇柱長與粒徑比值(L/dp)相當(dāng)?shù)纳V柱。

  沃特世公司用這個比值來衡量一個色譜柱的分離能力。L/dp值相等的色譜柱可以獲得相同的分離度。因此，對于兩根具有相當(dāng)L/dp值的色譜柱，越短的色譜柱(粒徑較小的填充顆粒)則可以在更短的時間內(nèi)提供相當(dāng)?shù)姆蛛x效果。