SAINT 試劑的儲存

我們所有的 SAINT 試劑均作為即用型轉(zhuǎn)染試劑在室溫下運(yùn)輸。到達(dá)后，應(yīng)儲存在 4-7°C 下（不要冷凍）。穩(wěn)定性研究表明，SAINT 試劑在開封后至少可穩(wěn)定一年。

我將 SAINT 試劑存放在冰箱中。我還能使用它嗎?

是的！解凍后，SAINT 試劑可能會出現(xiàn)渾濁和更粘稠。使用前，請確保渦旋充分以獲得均勻的分散，或者更好的是，聲音達(dá)到透明度。混合物不*全再溶解會導(dǎo)致工作濃度降低。

我可以在有血清的情況下使用 SAINT 嗎?

是的！在血清存在的情況下，SAINT 轉(zhuǎn)染不會受到抑制。然而，由于 siRNA 極易被血清中存在的 RNA 酶降解，因此可以使用使用 SAINT-sRNA 的替代無血清 siRNA 轉(zhuǎn)染方案。

抗生素會干擾我的轉(zhuǎn)染嗎?

不！抗生素對轉(zhuǎn)染效率沒有影響。

哪些參數(shù)會影響轉(zhuǎn)染結(jié)果?

通常，以下參數(shù)會影響轉(zhuǎn)染結(jié)果：

• DNA、RNA、寡核苷酸或蛋白質(zhì)的純度和濃度

• 載體序列（啟動子、poly（A）-tail、密碼子使用等）

• 添加的 SAINT/DNA 復(fù)合物量

• 靶細(xì)胞（細(xì)胞類型、細(xì)胞周期、傳代數(shù)等）

• 蛋白質(zhì)表達(dá)（時間依賴性表達(dá)水平、表達(dá)蛋白質(zhì)的毒性等）

與大多數(shù)其他轉(zhuǎn)染試劑和遞送系統(tǒng)一樣，使用高度純化的 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)/肽可獲得最佳結(jié)果。

細(xì)胞的“轉(zhuǎn)染性”變化很大。例如，非分裂和非貼壁細(xì)胞通常難以轉(zhuǎn)染，而其他細(xì)胞類型可能很容易轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染效率在 80% 到 100% 之間。此外，某些轉(zhuǎn)染試劑可能比其他試劑對某些細(xì)胞效果更好，而某些試劑可能對特定細(xì)胞類型有毒。因此，我們建議花一些時間使用報(bào)告基因構(gòu)建體（如 GFP）優(yōu)化特定細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染條件。

為什么我使用雙倍量的 SAINT 時，我的轉(zhuǎn)染效率沒有翻倍?

SAINT-DNA/sRNA/mRNA 中的陽離子組分與帶負(fù)電荷的 DNA/siRNA/mRNA 之間的電荷比對于高效轉(zhuǎn)染非常重要。作為起點(diǎn)，我們建議使用 1：20 比例的 DNA/RNA：SAINT 試劑 （w：v）（例如，對于 12 孔規(guī)格，0.5 ug DNA：10 ul SAINT-DNA）。為了在您的實(shí)驗(yàn)中獲得最佳轉(zhuǎn)染結(jié)果，值得優(yōu)化 DNA/RNA 劑量（例如，對于 12 孔規(guī)格，0.25 ug – 1 ug DNA）和 DNA/RNA：SAINT 試劑比例（例如，對于 12 孔規(guī)格，1：10 – 1：40）。

我應(yīng)該使用哪種 SAINT 試劑進(jìn)行 DNA、RNA 和/或蛋白質(zhì)的共轉(zhuǎn)染?

我們的 SAINT 試劑針對 DNA （SAINT-DNA）、siRNA （SAINT-sRNA）、mRNA （SAINT-mRNA） 和蛋白質(zhì) （SAINT-protein） 的轉(zhuǎn)染進(jìn)行了優(yōu)化，但它們都可以在一定程度上遞送其他分子。根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)要求，您可以將一種 SAINT 試劑用于兩個不同的分子，或者每個分子使用特定的 SAINT 試劑。