高效液相色譜法中，常用的試劑主要是有機溶劑、各種鹽類及水。有機溶劑一般多為購買的色譜級，所以出現(xiàn)問題的幾率較小。但是分裝出的有機溶劑，由于多次使用，被污染的概率較大，因此引入干擾峰的幾率較高。其次是水，水中的雜質(zhì)是干擾峰的主要來源之一，這是大家極易忽視的問題。采集波長較低的檢測方法，建議使用高品質(zhì)水，這樣可以避免很多因為水質(zhì)帶來的問題。再次是各種鹽類，這也是色譜干擾峰的主要來源之一。如圖2所示，與圖1相比，如圖2加入磷酸二氫鉀后，16.5min處出現(xiàn)干擾峰。對于無機鹽引入的干擾峰，在方法開發(fā)初期一般就會給眼關(guān)注，尋找解決方案。方法確定后，鹽的品種及級別也同時確定，因此鹽對方法的影響基本可控。水和無機鹽引起的干擾峰，比較快捷的解決方案是安裝鬼峰補集柱，這樣可以有效的避免此類干擾。如果使用離子對試劑，則需選擇不影響離子對試劑的鬼峰補集柱。
干擾峰來源的第二個方面是流動相配制及樣品前處理過程中接觸的各種器材。首先是流動相配制過程中接觸的器材，包括燒杯、玻璃棒、pH計、濾杯、濾膜、流動相瓶等。燒杯、玻璃棒是配制流動相首先接觸的器材，因此建議配制流動相的燒杯、玻璃棒專用。濾杯實驗人員只要清洗干凈一般不會帶來污染。需要注意的是，如果過濾含有離子對的流動相，建議增加清洗次數(shù)，避免清洗不干凈污染后續(xù)流動相。因此，對濾杯的清洗應(yīng)該建立基本的洗滌規(guī)程，保證實驗人員對使用的器材清洗到位。濾膜也是干擾峰引入源頭之一。如圖3所示，乙腈經(jīng)過有機系濾膜過濾后，在梯度洗脫中會引入較大干擾峰。鑒于色譜級試劑廠家已經(jīng)過膜，且多數(shù)儀器都有脫氣機，所以筆者建議無需再對甲醇、乙腈等純有機相過濾。流動相瓶引入干擾峰的現(xiàn)象主要出現(xiàn)在夏季，這是由于夏季溫度高，純水相容易滋生細菌。后續(xù)的流動相瓶使用人員清洗不到位，所以導(dǎo)致引入干擾峰。因此流動相瓶的清洗要建立嚴格的洗滌規(guī)程。再次樣品前處理過程中接觸的器材。前處理過程中接觸的器材主要包括容量瓶、濾頭、注射器及進樣瓶。容量瓶的清洗同流動相瓶、過濾裝置一樣，要建立良好的清洗規(guī)程。移液器材以及濾頭、注射器，多為塑料制品，其化學(xué)惰性較玻璃制品差，因此容易引入干擾峰。如下圖4、圖5、圖6所示案例，此方法檢測波長為210納米，溶劑為正己烷-異丙醇（90:10），溶劑分別接觸移液槍槍頭、一次性吸管、一次性注射器后，均引入不同的干擾峰。
進樣小瓶若為一次性使用，一般不會引入干擾峰。如果進樣瓶反復(fù)清洗，多次使用，則應(yīng)建立清洗規(guī)程并對其清洗干凈程度進行確認
與前兩類干擾峰相比，液相系統(tǒng)干擾峰的解決更加困難。液相系統(tǒng)是一個動態(tài)過程，所以此類問題解決過程耗費時間長，而且要求實驗人員有很高的色譜素養(yǎng)。對此類問題來源主要歸結(jié)為三類：強保留物質(zhì)、離子對污染和管路滋生細菌。首先是強保留物質(zhì)的干擾，其主要特征是寬峰。此類問題多數(shù)發(fā)生在等度洗脫中，梯度洗脫主要出現(xiàn)在高比例有機相處。這是由于強保留物質(zhì)在當(dāng)次進樣中未洗脫出，在后續(xù)進樣洗脫出來所致。如圖7中9分鐘處的色譜峰。
對于此類干擾峰，可通過延長采集時間或增加洗脫強度來消除對后續(xù)樣品的干擾。
系統(tǒng)干擾峰第二個方面是離子對、螯合劑這種難以洗脫的試劑對液相系統(tǒng)的污染。此類污染物多半是由于使用完畢含有離子對、螯合劑之類的流動相后，對系統(tǒng)的沖洗不干凈所致。此類污染物主要對一些采集波長較低的方法產(chǎn)生干擾，普遍表現(xiàn)是基線噪音大或者干擾峰，但隨著方法的運行會逐漸趨于正常。系統(tǒng)干擾峰第三個方面是系統(tǒng)滋生細菌。對于系統(tǒng)滋生細菌，多數(shù)讀者可能覺得不可思議，因為液相系統(tǒng)使用完畢都會用有機相沖洗保存。目前很多方法流動相A都是水相，雖然水相每日都會新配制，但如果由濾頭到比例閥這一段管路長時間在水相中就會滋生細菌。隨著時間的運行，梯度洗脫中會逐漸的產(chǎn)生干擾峰。此類問題雖然比較隱蔽，但比較容易解決，只要每日對放置純水相的通道用有機相沖洗即可避免此類問題。實際工作中，色譜工作者遇到的最大困難是如何識別判斷干擾峰屬于哪一類。由于找不清問題根源，所以也就難以有針對性的解決問題。
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