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由屠呦呦團隊深度開發(fā)的青蒿素研究，在近有了新的進展-通過增加用藥周期和聯(lián)合用藥解決瘧原蟲對其耐藥性[1]。而青蒿素也面臨著價格昂貴及供應(yīng)不足的難題，研究者利用菌體構(gòu)建合成青蒿素的前體的研究[2]能夠提供參考思路。
菌體的生長情況可用OD600初步判斷菌落生長情況并間接測定菌落的密度,
是因為某特定波長下，菌懸液的細胞濃度僅在一定的范圍內(nèi)與對應(yīng)的吸光度值呈正比關(guān)系，不同的是，針對非球狀的放線菌和某些霉菌等以及培養(yǎng)基中有其他渾濁物質(zhì)則不能通過該方法推斷濃度。
如果菌液OD600在0.6-0.8之間，表明細菌處于旺盛生長的對數(shù)生長期細胞生長，OD600>3表明細菌已經(jīng)飽和等，這些僅僅是粗略估計菌落的生長情況。
想要知道較為的菌落濃度，需要將制備好的菌懸液梯度稀釋后，以未加菌液的培養(yǎng)基做空白對照，使用分光光度計分別測定OD600；并用平板計數(shù)法計算菌落總數(shù)。繪制標(biāo)準曲線，來推算未知濃度菌液的生長狀態(tài)。
若某一菌液的OD值為負，可能是細菌與培養(yǎng)基發(fā)生變色反應(yīng)，顏色的改變影響吸光度數(shù)值。菌液在測定前保持懸浮狀態(tài)能夠保證測定的準確性。
由于600nm處對濁度的敏感度高，常用600nm為檢測波長，也可以對菌液進行全波長掃描，在其大吸收峰波長下進行測定。
[1] Wang J, Xu C, Liao F L, et al. A Temporizing Solution to “Artemisinin Resistance”[J]. New England Journal of Medicine, 2019.
[2]吳濤, 吳勝明, 殷晴, 等. 在大腸桿菌內(nèi)引入甲羥戊酸途徑合成抗瘧藥青蒿素前體——紫穗槐-4,11-二烯[J]. 生物工程學(xué)報, 2011, 27(7).
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