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皖儀科技液相色譜對碳酸飲料中阿斯巴甜的檢測

前言

阿斯巴甜作為食品添加劑（甜味劑），其甜度約為蔗糖的100～200倍，可適量用于碳酸飲料、濃縮果汁、糖果、乳制品、冷凍飲品、調(diào)味品等食品。2023年7月，世界衛(wèi)生組織（WHO）下屬的國際癌癥研究機構(gòu)（IARC）依據(jù)對人類致癌性的“有限證據(jù)"，將阿斯巴甜歸為可能對人類致癌物質(zhì)（2B類），引發(fā)了消費者對阿斯巴甜安全性的廣泛關(guān)注。阿斯巴甜的副作用仍存在一定的爭議，對食品中阿斯巴甜的含量檢測更顯得尤為重要。

本篇文章參考了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定》GB 5009.263-2016 高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器進行檢測。實驗結(jié)果顯示，阿斯巴甜的線性良好，R值在0.999以上，阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰正常，理論塔板數(shù)為8500以上。阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進樣6次，保留時間RSD值為0.104%，峰面積RSD值為0.454%，重復(fù)性較好。以碳酸飲料作為測試樣品，可得碳酸飲料樣品中阿斯巴甜濃度為23.639 μg/mL，阿斯巴甜的使用量為0.118 g/kg，檢測結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足對碳酸飲料中阿斯巴甜的檢測需求。

關(guān)鍵詞：阿斯巴甜；高效液相色譜法；紫外檢測器；碳酸飲料。

1 實驗方法

1.1儀器配置

皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀

表1 高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

1.2 實驗材料及輔助設(shè)備

乙腈：色譜純；

阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品：CAS 22839-47-0，純度大于99%；

分析天平；

水浴鍋；

超聲波清洗機；

渦旋混合器；

離心機；

0.45μm水系濾膜。

1.3 測試條件

流動相：乙腈：水=20：80；

色譜柱：C18色譜柱，4.6×250mm，5μm；

柱溫：30℃；

流速：0.8 mL/min；

進樣量：20μL；

檢測波長：200nm。

1.4 溶液配制

1.4.1 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)儲備液（0.5mg/mL）

 稱取0.0252g阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品 ，用水溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中并定容至刻度，置于4℃冰箱中保存，有效期為90天。

1.4.2 阿斯巴甜標(biāo)曲實驗工作液

將阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)儲備液（0.5mg/mL）用水逐級稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)系列，阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度分別為100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液系列。置于4℃冰箱中保存，有效期為30天。

2 結(jié)果與討論

2.1系統(tǒng)適用性

圖1 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

表2阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜參數(shù)

說明：由上述譜圖可見，阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰正常，保留時間為6.916 min，理論塔板數(shù)為8500以上。

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)

說明：本次測試的阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)工作曲線濃度為100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL。阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.999，滿足實驗分析需求。

2.3 重復(fù)性

圖3 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)性實驗色譜圖

表3阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜參數(shù)

說明：阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進樣6次，保留時間RSD值為0.104%，峰面積RSD值為0.454%，重復(fù)性較好。

2.4 樣品測試

選擇碳酸飲料作為基質(zhì)，稱取樣品4.9982g，置于50mL燒杯中，在50℃水浴上除去二氧化碳，然后將試樣全部轉(zhuǎn)入25mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻，4000 r/min離心5min，上清液經(jīng)0.45μm水系濾膜過濾，進樣量20μL，供高效液相色譜儀測定。

圖4 碳酸飲料樣品溶液色譜圖

表4 碳酸飲料樣品溶液色譜參數(shù)

表5 碳酸飲料樣品阿斯巴甜使用量

*指標(biāo)要求源于《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》GB2760-2014

說明：通過計算得碳酸飲料中阿斯巴甜濃度為23.639 μg/mL，碳酸飲料樣品阿斯巴甜使用量為0.118 g/kg，滿足《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》GB2760-2014規(guī)定的碳酸飲料中阿斯巴甜最大使用量要求，檢測結(jié)果正常。

2.5 注意事項

阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)貯備液及相關(guān)工作液均需在4℃條件下保存，實驗前要注意溶液的有效期。

3 結(jié)論

本篇文章參考了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定》GB 5009.263-2016 高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器進行檢測。實驗結(jié)果顯示，阿斯巴甜的線性良好，R值在0.999以上，阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰正常，理論塔板數(shù)為8500以上。阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進樣6次，保留時間RSD值為0.104%，峰面積RSD值為0.454%，重復(fù)性較好。以碳酸飲料作為測試樣品，可得碳酸飲料樣品中阿斯巴甜濃度為23.639 μg/mL，阿斯巴甜的使用量為0.118 g/kg，檢測結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足碳酸飲料中阿斯巴甜的檢測需求。