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NuSmart^®在植物DNA條形碼中應(yīng)用

——無(wú)液氮研磨、5分鐘處理、2小時(shí)內(nèi)出結(jié)果

2003年，加拿大huang家學(xué)會(huì)的Paul Herbert等人shou次提出DNA條形碼，利用一段基因片段如葉綠體基因作為條形碼，對(duì)不同物種的DNA進(jìn)行快速鑒定。經(jīng)過(guò)一二十年的發(fā)展，該技術(shù)越來(lái)越成熟。隨著全球氣候變化、環(huán)境保護(hù)問(wèn)題、能源問(wèn)題的加劇，對(duì)生物多樣性的深入認(rèn)知以及對(duì)生物多樣性保護(hù)和可持續(xù)發(fā)展、利用的需求越來(lái)越強(qiáng)烈。而植物DNA條形碼技術(shù)為植物的分類(lèi)和鑒定提供了高效、準(zhǔn)確的方法，大大促進(jìn)了人類(lèi)檢測(cè)、了解和利用生物多樣性的能力。

目前植物DNA條形碼技術(shù)廣泛應(yīng)用于各行各業(yè)，例如，

→新物種鑒定   →藥用植物          →種子資源管理  

→中藥材鑒定   →植物形態(tài)學(xué)提供補(bǔ)充   →法醫(yī)鑒定

目前植物DNA條形碼技術(shù)利用分子生物學(xué)技術(shù)，主要流程包括樣本收集、DNA提取、引物篩選、優(yōu)化PCR反應(yīng)體系、PCR產(chǎn)物純化和測(cè)序、序列分析。而對(duì)于實(shí)驗(yàn)室工作人員來(lái)說(shuō)，DNA的提取過(guò)程中涉及到許多步驟，例如液氮研磨、CTAB提取或離心柱提取。整個(gè)周期都需要消耗2-3個(gè)小時(shí)。而我司開(kāi)發(fā)的NuSmart^®植物組織PCR試劑盒能夠縮短提取時(shí)間，也無(wú)需液氮研磨。該方法最大的特點(diǎn)如下：

—對(duì)樣本量要求低

—操作簡(jiǎn)單快速（5分鐘處理樣本）

—55℃處理

—無(wú)需液氮研磨

—無(wú)需區(qū)分多糖多酚含量

—不用離心

—不使用有毒有害有機(jī)試劑

 

案例 葉片和種子樣本處理后擴(kuò)增2對(duì)引物

 

葉片

1、水稻 2、玉米 3、油菜 4、小麥 5、大豆 6、棉花 7、芝麻 8、擬南芥

藥材

9、銀耳 10、靈芝 11、紅花 12、艾草 13、益母草 14、當(dāng)歸 15、川穹

種子

16、油麥菜（種子） 17、小白菜 18、小菠菜 19、大葉菠菜 20、雞毛菜 21、香菜 22、生菜

23、薄荷 24、玫瑰 25、波斯菊 26、牽牛花 27、太陽(yáng)花 28、勿忘草 29、滿(mǎn)天星 30、向日葵

葉片

1、水稻 2、玉米 3、油菜 4、小麥 5、大豆 6、棉花 7、芝麻 8、擬南芥

藥材

10、銀耳 10、靈芝 11、紅花 12、艾草 13、益母草 14、當(dāng)歸 15、川穹

種子

17、油麥菜 17、小白菜 18、小菠菜 19、大葉菠菜 20、雞毛菜 21、香菜 22、生菜 23、莧菜

24、薄荷 24、玫瑰 25、波斯菊 26、牽牛花 27、太陽(yáng)花 28、勿忘草 29、滿(mǎn)天星 30、向日葵

 

使用NuSmart^®植物組織PCR試劑盒（貨號(hào)Nu-P01）處理葉片、藥材和種子，使用2× Plant Super TaqMix擴(kuò)增分別擴(kuò)增pITS（500bp）和trnH-psbA（280-750bp）。