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技術文章

廣譜型DNA免核酸提取試劑M-DNA01的使用方法

閱讀:553          發(fā)布時間:2023-2-9

產品貨號:M-DNA01

產品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產品規(guī)格:1ml 50T

試劑盒應用

本試劑盒中配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解方式獲得高質量的DNA。該DNA無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、Lamp等擴增。

DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、細胞、組織(例如淋巴結、脾臟、腎臟、扁桃體、肺、肌肉等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、鼠尾、病毒、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌、葡萄球菌以及環(huán)境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

DNA-Lysis

1 mL

保存條件

4oC保存。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質屬正常現(xiàn)象)。

需要準備

金屬恒溫浴、離心機

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

(1)組織液包括組織研磨液、傳代細胞懸液、血清、唾液、尿液等。取20 μL組織液置于離心管中。

(2)取10 μL(1)中組織液,加入20 μL DNA-Lysis。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

注意:組織液為血液樣品時,提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時,需要將提取物按照1:40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中。

2. 組織塊的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

(2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),并將組織塊剪成肉泥狀,放在(1)中溶液中。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

3. 菌類的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培養(yǎng)液,取20μL放在(1)中溶液中。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應體系

注意事項

(1)在進行大量樣品檢測時,可將本試劑盒的試劑預分裝到8聯(lián)PCR管,用多通道移液器進行多樣本的處理。

(2)取樣的細胞量應當適中,濃度不宜過高或過低,處理后溶液應當以透明為宜。擴增細胞DNA時,取2000個細胞以內即可;擴增病毒基因時需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細胞數(shù)量。

(3)樣品處理過程中應當防止交叉污染,推薦設置陰性樣品參與處理過程,以檢測環(huán)境的污染。

(4)PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度。

(5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月。

(6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。



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