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技術(shù)文章

廣譜型DNA免核酸提取試劑廣譜型DNA免核酸提取試劑的使用方法

閱讀:446          發(fā)布時(shí)間:2022-10-31

產(chǎn)品摘要:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品貨號(hào):M-DNA01

產(chǎn)品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品規(guī)格:1ml 50T

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒中采用配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需反復(fù)離心,通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無需進(jìn)行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、Lamp等擴(kuò)增。

DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、細(xì)胞、組織(例如淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、扁桃體、肺、肌肉等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、鼠尾、病毒、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌、葡萄球菌以及環(huán)境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

DNA-Lysis

1 mL

保存條件

4oC保存。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正常現(xiàn)象)。

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴、離心機(jī)

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

(1)組織液包括組織研磨液、傳代細(xì)胞懸液、血清、唾液、尿液等。取20 μL組織液置于離心管中。

(2)取10 μL(1)中組織液,加入20 μL DNA-Lysis。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

注意:組織液為血液樣品時(shí),提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時(shí),需要將提取物按照1:40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中。

2. 組織塊的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

(2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),并將組織塊剪成肉泥狀,放在(1)中溶液中。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

3. 菌類的處理

(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培養(yǎng)液,取20μL放在(1)中溶液中。

(3)混勻。

(4)置于55oC加熱5分鐘。

(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系

注意事項(xiàng)

(1)在進(jìn)行大量樣品檢測時(shí),可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián)PCR管,用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理。

(2)取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中,濃度不宜過高或過低,處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。擴(kuò)增細(xì)胞DNA時(shí),取2000個(gè)細(xì)胞以內(nèi)即可;擴(kuò)增病毒基因時(shí)需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量。

(3)樣品處理過程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染,推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程,以檢測環(huán)境的污染。

(4)PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度。

(5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個(gè)月。

(6)為防止試劑盒污染,請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用


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