一、人淋巴懸浮細胞轉染試劑（Zeta Life）產品介紹

Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑，此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產的主要關鍵技術之一。

二、產品應用

各種細胞類型中高的轉染效率。

可用于多種真核細胞系的DNA轉染、siRNA轉染和共轉染；

可用于各種原代細胞的DNA轉染、siRNA轉染；

可轉染極度難轉染的免疫細胞、懸浮細胞，如:T細胞、NK細胞、人淋巴細胞、THP-1等；

可高效率轉染siRNA到任何哺乳動物細胞。

三、產品說明

1、產品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號：AD600075

規(guī)格：0.75ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。

四、使用說明

1、材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內毒素 ）

2、操作步驟

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進行轉染。

核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細胞換液：轉染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉染過程中不用換液。

分析結果：質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。

轉染操作示意圖：

轉染實驗推薦用量

五、優(yōu)秀表現(xiàn)

Zeta Life多肽小分子轉染試劑的尺寸大小是傳統(tǒng)脂質體轉染試劑體積的1/10;

本轉染試劑是通過細胞內?和細胞主動吸收進入細胞；

本轉染試劑進入后對細胞膜無物理性損傷，不易出現(xiàn)細胞變形，保持高的細胞活力；

不激活細胞表面或細胞體內marker;

可反映真實的細胞通路蛋白原始數(shù)據(jù)；

可轉染免疫細胞、懸浮細胞等。

效果對比圖，Zeta Life轉染試劑轉染效率高于Lipo3000、Lipo2000

六、注意事項

1、質粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水，但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質粒轉染效率會下降 80%左右，甚至會轉染失敗。

2、質粒必須去除內毒素，內毒素對細胞將產生很大的細胞毒性，會導致轉染效率下降 70%-80%左 右，甚至導致轉染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內毒素質粒提取試劑盒）。

3、復合物的制備過程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉染試劑進行稀釋，只需將核酸和轉染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合，如果進行了稀釋會導致轉染失。

4、轉染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次，室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細胞培養(yǎng)板。

5、轉染 24 小時后進行正常換液，不能像 Lipo2000 一樣轉染 4-6 小時后換液。

6、原代細胞、免疫細胞轉染時，細胞基礎培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。

七、成功轉染案例圖賞

1、NK細胞

2、RAW264.7細胞

3、人淋巴 懸浮細胞

4、A549細胞

5、N2a/Neuro-2a小鼠神經瘤母細胞

6、H9C2大鼠心肌細胞

Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑系列：

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600025 （Zeta Life原代細胞轉染試劑）0.25ml

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600050 （Zeta Life真核細胞轉染試劑）0.5ml

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600075 （Zeta Life可代謝轉染試劑）0.75ml

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600150 （Zeta Life免疫細胞轉染試劑）1.5ml

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600500 （Zeta Life懸浮細胞轉染試劑）5ml

品牌：美國Zeta Life 貨號：AD601000 （Zeta LifeRAW264.7細胞轉染試劑）10ml

人淋巴懸浮細胞轉染試劑（Zeta Life）

Zeta Life介紹：

美國 Zeta Life 公司成立于 1989 年，是國際無血清細胞培養(yǎng)基 DMEM/F12 主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基、以及干細胞、免疫細胞及腫瘤細胞等多種不同類型哺乳動物細胞的無血清培養(yǎng)液生產經驗；也是目前世界胎牛血清、無血清培養(yǎng)基最大的 OEM 供應商之一；每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫(yī)師檢驗證明及品質測試報告；ZETA LIFE 血清在 100 級的無菌間采用全自動方式制造生產，具有良好的可再現(xiàn)性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑，此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產的主要關鍵技術之一。