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Zeta Life 轉(zhuǎn)染試劑高效率轉(zhuǎn)染RAW 264.7細胞方法總結(jié)
閱讀：1529 發(fā)布時間：2020-3-26在6孔板中用Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑高效率轉(zhuǎn)染RAW 264.7細胞方法總結(jié)。
實驗方案如下：
一、質(zhì)粒DNA準備
1、質(zhì)粒DNA濃度700ng/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內(nèi)毒素），
二、操作流程
1、先將細胞接種到6孔板細胞培養(yǎng)板，細胞匯合度在70%左右，再進行轉(zhuǎn)染。
2、復合物制備：將質(zhì)粒DNA與Zeta Life Advanced Transfection Reagent 貨號AD600150轉(zhuǎn)染試劑按照1:1（12ug:12ul）關(guān)系直接混合，用移液器吹吸10-15次混勻，室溫靜止10-15分鐘。
3、將復合物加入*培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)板，并輕輕混勻，放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)（不建議把復合物加入到無血清的培養(yǎng)基里面，后期會進一步摸索此條件）。
4、轉(zhuǎn)染24小時后對細胞進行正常換液。
5、質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染48小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率
下圖是用Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染raw 264.7細胞的熒光和明場圖片
三、美國Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑信息：
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 報價 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600025 | 0.25ML | 1 | 1590 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600050 | 0.5 | 1 | 2390 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600075 | 0.75 | 1 | 2890 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600150 | 1.5ML | 1 | 4490 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600500 | 5ML | 1 | 電詢 |
Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD601000 | 10ML | 1 | 電詢 |
四、RAW 264.7細胞簡述：
RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞. 此細胞株源自雄性Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。 可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。 可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。