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四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類是動物養(yǎng)殖中常用的三類獸用抗生素，對多種常見的病原性微生物有良好的抑制作用。

盡管三者的誕生時間、抗菌作用和用途各不相同，但在LCMS被廣泛用于獸用藥檢測后，發(fā)現(xiàn)他們在樣品處理過程中凈化和富集方法極為相似，因此常常被置于一個樣品處理方法內(nèi)同時檢測。

目前，三類抗生素常見的樣品處理方式為粗提結(jié)合固相萃取小柱法（SPE）。

然而，由于SPE柱裝填過程中的不均勻，導(dǎo)致小柱個體之間和單支小柱內(nèi)部柱床材料的不均勻性。在實(shí)際操作中，這種不均勻性直接引起了“溝渠效應(yīng)"，不得不更嚴(yán)格地控制液體流經(jīng)小柱的速度，且最終會影響檢測結(jié)果的平行性。

普敦科技·解決方案

為此，普敦科技使用較為成熟的磁性分散萃取方法（mSPE）替代SPE小柱。

簡化SPE小柱使用中的繁瑣步驟，拋棄了負(fù)壓泵、輸液管、切換閥、玻璃缸等等設(shè)備，僅僅通過移液、混勻和吸磁即可完成全部的凈化和富集，結(jié)果更為可靠。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

回收率/Recovery rate

采用上述方法，使用空白豬肉、牛肉、豬肝和豬腎樣品，分別添加適量的36種抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，制得樣品處理液中終濃度為50ng/mL的空白加標(biāo)樣品。

經(jīng)提取凈化后上機(jī)LCMS檢測，36種抗生素在四種動物性食品基質(zhì)中回收率絕大部分能夠達(dá)到70%以上的總體回收率，符合定量分析的基本要求。

基質(zhì)效應(yīng)/ Stromal Effect

以兩種方法分別添加36種抗生素獲得空白處理液加標(biāo)樣品。

可以看到，mSPE處理樣品后的基質(zhì)抑制效應(yīng)顯著地低于SPE法，前者的基質(zhì)效應(yīng)更加優(yōu)異。

準(zhǔn)確度/ Accuracy

36種抗生素使用mSPE法凈化的回收率69.45-107.6%，使用SPE法的回收率55.85-132.80%。

兩者相比較，準(zhǔn)確度并無顯著差異，但mSPE法中36種化合物回收率的分布較為集中，SPE法的回收率結(jié)果較為離散。

精密度/ Precision

進(jìn)一步分析三類抗生素測試結(jié)果的離散性發(fā)現(xiàn)，mSPE法的精密度略好于SPE法。

參照GB 31658.17-2021《動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定高效液相法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》，采用親水親脂平衡的磁性萃取材料替代HLB材質(zhì)的SPE小柱，使用分散萃取法優(yōu)化豬肉和類似食品原材料中的四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類共36種抗生素的凈化效果。

不僅全面達(dá)到國標(biāo)所要求的各項(xiàng)性能參數(shù)和要求，且使得操作過程更為簡捷方便。

相對于傳統(tǒng)的SPE柱，mSPE法拋棄了小柱、泵、閥和管路，通過移液、混勻、吸磁的簡單操作，避開了樣品雜質(zhì)顆粒堵塞小柱的風(fēng)險，也避免了因SPE小柱流速控制不均導(dǎo)致的一系列數(shù)據(jù)質(zhì)量問題。