N端序列分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

Edman降解（埃德曼降解）法，是由菲爾•埃德曼（Pehr Edman）首先創(chuàng)立用于肽鏈或dànbáizhì中N-端氨基酸序列分析的方法。Edman降解法檢測的原理非常簡單，在堿性條件下反應(yīng)，用異硫氰酸苯酯（Phenylisothiocyanate, PITC）與待檢測的dànbáizhì（多肽）的N-端氨基生成苯氨基硫甲酰（PTC）的衍生物，然后處理-關(guān)環(huán)-選擇性切斷肽鏈N-端，得到N-端氨基酸殘基的噻唑啉酮苯胺衍生物。接著用有機(jī)溶劑萃取衍生物，在酸的作用下，不穩(wěn)定的衍生物轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的的乙內(nèi)苯酰硫脲（PTH）衍生物，余下肽鏈中的酰胺鍵不受影響。通過用HPLC或電泳法分析生成的乙內(nèi)酰苯硫脲氨基酸（PTH-氨基酸），可以鑒定出氨基酸類別。重復(fù)氨基酸鑒定反應(yīng)可以達(dá)到對(duì)N端氨基酸按照從N端到C端的方向依次對(duì)氨基酸序列進(jìn)行分析。對(duì)于序列較長的dànbáizhì（多肽），還可以將樣品先切成小的肽段，先對(duì)肽段序列分析，再將肽段信息進(jìn)行拼接即可獲得完整dànbáizhì的序列信息。

Edman降解法用于Nduāncèxù的優(yōu)點(diǎn)：

• PITC與所有氨基酸殘基的反應(yīng)產(chǎn)率和回收率高，因此副產(chǎn)物少，可通過色譜進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定； 2. 反應(yīng)時(shí)間快，對(duì)于大多數(shù)氨基酸殘基來說，30min耦合時(shí)間，5min切割反應(yīng)時(shí)間即可； 3. 反應(yīng)后的肽鏈仍然是完整的，可用Edman降解法重復(fù)測定新生的N末端氨基酸。

Edman降解法用于Nduāncèxù需要注意的問題：

• 樣品純度需>90%，鹽離子含量在50 mmol/L之內(nèi)，不含SDS等變性劑，N端必須是均一的高純樣品； 2. 10 Pmol 樣品可以測定20 aa； 3. 液體樣品不能含有蛋白酶，建議盡早測試，防止時(shí)間太長容易降解； 4. 轉(zhuǎn)膜樣品在轉(zhuǎn)膜前不宜放置太久以防樣品擴(kuò)散，轉(zhuǎn)膜后可密封保存3-6個(gè)月，建議使用Coomassie R-250進(jìn)行染色，電泳緩存液建議使用CAPS buffer； 5. 樣品無信號(hào)峰是，建議蛋白進(jìn)行N-端封閉； 6. 建議整個(gè)反應(yīng)過程中盡可能使用高純buffer。

案例分析：

百泰派克生物科技采用島津公司推出的PPSQ系列儀器實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白或者多肽樣品N端氨基酸序列的分析，可以分析N端30個(gè)以上的氨基酸。以下是我們對(duì)某一蛋白藥物進(jìn)行分析的實(shí)際色譜結(jié)果，該項(xiàng)目對(duì)樣品中蛋白藥物的前15個(gè)氨基酸進(jìn)行了分析。從下圖（第15個(gè)氨基酸的色譜圖）可以看出，色譜峰值仍然非常高，可以得到非常準(zhǔn)確的結(jié)果。

中/英文項(xiàng)目報(bào)告

在技術(shù)報(bào)告中，百泰派克會(huì)為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告，報(bào)告包括： 1. 實(shí)驗(yàn)步驟（中英文） 2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文） 3. 質(zhì)譜圖片 4. 原始數(shù)據(jù) 5. 生物藥物N端序列信息

生物藥物N端序列測定一站式服務(wù)

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

N端序列分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹